細(xì)胞培養(yǎng)所需的溫度取決于物種的體溫和分離培養(yǎng)細(xì)胞類(lèi)型的微環(huán)境

　　細(xì)胞培養(yǎng)所需的溫度取決于物種的體溫和分離培養(yǎng)細(xì)胞類(lèi)型的微環(huán)境。雖然大多數(shù)人類(lèi)和哺乳動(dòng)物細(xì)胞系在36–37°C下孵育，但源自冷血?jiǎng)游锏募?xì)胞系可以在15°C至26°C之間的更寬溫度范圍內(nèi)維持。大多數(shù)在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的人類(lèi)和哺乳動(dòng)物細(xì)胞系的pH值應(yīng)嚴(yán)格控制并保持在7.2–7.4的生理pH值。相反，一些成纖維細(xì)胞系有利于pH7.4和7.7之間稍微偏堿性的條件，而轉(zhuǎn)化細(xì)胞系更喜歡pH7.0和7.4之間的偏酸性環(huán)境。
　　通過(guò)嚴(yán)格調(diào)節(jié)和監(jiān)測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境溫度的振蕩培養(yǎng)箱，可以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞培養(yǎng)的恒定溫度。隨著細(xì)胞的繁殖，它們的生長(zhǎng)需要在培養(yǎng)基中提供能量，例如以葡萄糖的形式。代謝時(shí)，其副產(chǎn)物包括丙酮酸、乳酸和CO2。大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)可以使用乳酸檢測(cè)儀進(jìn)行乳酸含量檢測(cè)。由于pH值取決于CO2和HCO3-（碳酸氫鹽）的平衡，因此向細(xì)胞培養(yǎng)基中添加基于碳酸氫鹽的緩沖液也可以平衡CO2濃度。其他pH緩沖液可以是有機(jī)性質(zhì)的，包括4-(2-羥乙基)-1-哌嗪乙磺酸(HEPES)(10–25mM)或3-(N-嗎啉代)丙磺酸(MOPS)(20mM)。
　　許多細(xì)胞培養(yǎng)基含有pH指示劑（例如，酚紅），顯示酸性（黃色）和堿性（粉紅色）條件之間的顏色范圍。此外，大氣中CO2濃度的波動(dòng)也可以改變pH水平。因此，細(xì)胞應(yīng)在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，該培養(yǎng)箱還允許將CO2張力調(diào)整至5–7%。為了延遲pH值的變化，可以用其他碳源（例如半乳糖或果糖）代替葡萄糖。雖然這會(huì)減慢細(xì)胞生長(zhǎng)的速度，但也會(huì)減少乳酸等副產(chǎn)物的積累。對(duì)于在低氧張力（缺氧）下模擬病理或生理?xiàng)l件的特定細(xì)胞培養(yǎng)物，建議使用可調(diào)節(jié)的1–21%氧濃度與氮?dú)馄胶獾娜毖跖囵B(yǎng)箱。蘇州阿爾法的葡萄糖乳酸分析儀、生物反應(yīng)器、恒溫恒濕培養(yǎng)箱細(xì)胞培養(yǎng)搖瓶等廣泛用于細(xì)胞培養(yǎng)。